SPOSOBY OKREŚLANIA KREATYNINY W SUROWICY I MOCZU
Zasada określania. Odczynniki: 1) 10% NaOH,
nasycony roztwór kwasu pikrynowego (+ l,5°/o),
10% roztwór wolframianu sodu,
% N kwas siarkowy (H2SO4),
N/10 kwas solny (HC1),
5 objętości odczynnika 2 + 1 objętość odczynnika 1. Wykonanie :
I. Surowica: a. Do 1 ml surowicy dodaje się 7 ml wody przekroplonej + 1 ml
odczynnika 3 + 1 ml odczynnika 4 (ostatni odczynnik dodaje się kroplami stale mie-
szając). Mieszaninę pozostawia się przez 10 min., potem się ją przesącza.
b. Do 5 ml przesączu dodaje się 2,5 ml świeżo (ex tempore) przygotowanego
odczynnika 6.
c. Po 10 min. odczytuje się w elektrofotometrze przy filtrze 490 lub 550 Angstró-
mów nastawiając na 0 wynik odczytania próby ślepej (5 ml wody przekroplonej
+ 2,5 ml odczynnika 6).
II. Mocz: a. W kolbie miarowej o pojemności 100 ml miesza się 1 ml moczu + 20 ml
odczynnika 2 + 1,5 ml odczynnika 1.
b. Po 10 minutach należy dopełnić do kreski wodą destylowaną, zmieszać i odczytać przy filtrze 490 albo 550 Angstrómów. nastawiając kolorymetr na 0 przy odczytywaniu wyniku próby ślepej (1 ml wody zamiast moczu — dalej jak w punkcie a).
Wynik I i II odczytuje się na krzywej wykonanej według wzorca.
III. Przygotowanie wzorca (standardu) macierzystego: 1,0 g czystej kreatyniny
rozpuszcza się w 1 litrze odczynnika 5 i przechowuje w dobrze zakorkowanym na-
czyniu (roztwór stały). Z tego wzorca macierzystego przygotowuje się wzorzec robo-
czy rozcieńczając 1 : 100 : 1 ml wzorca macierzystego + 10 ml odczynnika 5, dopeł-
niając wodą do kreski w kolbie miarowej o pojemności 100 ml (1 ml wzorca robo-
czego zawiera 0,01 mg kreatyniny). Z wzorca roboczego przygotowuje się kilka
rozcieńczeń 1:2, 1:4, 1:8 itd.; z każdym rozcieńczeniem postępuje się jak przy
analizie i odczytuje się wyniki w kolorymetrze, oznaczając je na papierze milime-
trowym. Łącząc poszczególne punkty otrzymane w ten sposób wykreśla się krzywą.
Dla moczu należy odczytany na krzywej wynik pomnożyć przez 50.